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脂质体作为体内和体外输送载体的工具,已经研究的十分广泛,中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA,借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。带正电的阳离子脂质体,DNA并没有预先包埋在脂质体中,而是带负电的DNA自动结合到带正电的脂质体上,形成DNA-阳离子脂质体复合物,从而吸附到带负电的细胞膜表面,经过内吞被导入细胞。下面让我们一起来看看脂质体转染的原理与方法吧!脂质体转染操作步骤进行实验之前,请先规划好实验,一般细胞转染需要24h-72h,所以要充分了解细胞生长速度,计算所需脂质体和DNA...
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抗体是一种由浆细胞(效应B细胞)分泌,被免疫系统用来鉴别与中和外来物质如细菌、病毒等的大型Y形蛋白质,仅被发现存在于脊椎动物的血液等体液中,及其B细胞的细胞膜表面。抗体能识别特定外来物的一个特征,该外来目标被称为抗原。1.做流式的抗体和免疫组化的抗体是一样的吗?不一定能通用。流式是用直接标记还是间接标记?如果是直接标记的话,那这个抗体一般不是FITC标记或者就是TRITC,PE之类的。如果恰好你的免疫组化,也是想用荧光素标记的抗体来直接标记,那就可以通用。如果你的免疫组化要用...
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常见的RT-qPCR流程一般分为RNA提取,逆转录、荧光定量PCR三个步骤,当有的课题需要对某物种进行多种处理后,检测某个基因的表达水平,以验证该基因应对不同胁迫压力的耐受力;或者经某种病原菌侵染后,检测寄主不同基因的表达水平,以探究可能涉及的通路及互作机理等……对于这几类样本数量较大,但样本只需要检测一次的实验方案,我们常常推荐一步法RT-qPCR,即逆转录与荧光定量PCR配制一管体系,只需一次上机即可完成表达量的检测。由于将RNA逆转录与荧光定量PCR的体系配制合为一步,...
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石蜡切片是一种常见的组织学技术,用于观察组织的微观结构。在进行石蜡切片实验时,有许多细节需要注意,这些细节往往决定了切片的质量和结果的准确性。那么石蜡切片Protocol实验需要注意哪些要点呢?本期内容将为你揭示一些关键的细节,助你获得最佳的石蜡切片效果。1.组织固定1)取新鲜组织,分割块的大小,宜小不宜大,一般不超过1cm3,用预冷的PBS冲洗,置于10%的福尔马林固定液中固定24小时。2)取出组织,蒸馏水冲洗30分钟。2.组织脱水,包埋,切片1)自动脱水:设定脱水程序,7...
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在培养贴壁细胞的时候,偶尔会出现细胞接种后贴壁不均匀的情况。有的地方长得非常密集,有的地方却太稀疏。虽然这对于常规培养并不算大问题,但有时则可能影响后续的实验进程。所以一旦遇到贴壁不匀,建议排查原因并优化操作方案。那么,造成细胞贴壁不均匀的原因有哪些呢?本期内容一起来跟着小编的脚步学习一下吧!情况一:局部生长密集,密集处呈不规则分布原因:一般是接种时没有混匀,或者细胞传代时没有消化che底从而形成细胞团块导致的解决方案:继续培养1-2天,待细胞状态稳定后,重新消化接种,接种时...
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