细胞冻存与复苏的常见问题

细胞冻存与复苏的常见问题细胞冷冻保存是细胞保留的主要方式之一。借助冷冻技术，将细胞置于-196℃的液氮中，可使其暂时脱离生长状态并保持其细胞特性，以备日后在实验中复苏使用。这一方法不仅可以预防正在培养的细胞遭受污染或其他意外情况而导致种群丧失，同时也发挥了细胞保护的功效。那么你知道细胞冻存与复苏的常见问题吗？让我们一起来看看吧！一、细胞冻存为什么要添加保护剂细胞冻存是将细胞放在低温环境，减少细胞代谢，以便长期储存的一种技术。细胞在不加任何保护剂的情况下冷冻，细胞内外的水分会很...

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DMEM培养基的主要成分与应用

DMEM(Dulbecco'sModifiedEagleMedium)是一种广泛应用于细胞培养领域的基本培养基。下面让我们一起来看看DMEM培养基的主要成分与应用吧！DMEM培养基的主要成分包括：糖类：例如葡萄糖，为细胞提供能量和碳源。氨基酸：作为蛋白质合成的基本组成部分。维生素：如维生素B群、维生素C等，参与细胞代谢过程。矿物质：包括钠、钾、钙、镁等，维持细胞内外的离子平衡。胺基酸：例如谷胱甘肽、谷氨酰胺等，具有抗氧化和细胞保护作用。添加剂：例如胰岛素、转铁蛋白等，为特定类...

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培养基制备的注意事项

培养基的作用是为微生物提供生长和繁殖所需的营养物质和环境条件。培养基的质量直接关系到检验结果的准确性和可靠性，因此对于微生物检验而言，培养基的质量控制尤为重要。那么你知道培养基制备的注意事项有什么吗？让我们一起来看看吧！一、配置要求正确地制备培养基是进行微生物检验的基础。当实验人员使用商业化脱水合成培养基来配制培养基时，应严格按照产品说明进行配制，并做好配制记录。在配制过程中，实验人员需要遵守相关操作标准，戴上口罩以防吸入含有有毒物质的培养基粉末。在称量和溶解培养基时应使用专...

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蛋白表达的常见问题

蛋白表达实验的时，有时候实验会觉得参考实验方法和克隆的蛋白基因序列完q没有问题，但蛋白电泳就是没有结果。那么你知道蛋白表达的常见问题有哪些吗？让我们一起来看看吧！1、载体构建错误，很多克隆新人常常弄错读码框。比如Qiagen的pQE系列载体，其复制位点常有一两个碱基的差异；另外有些酶产生粘端有些酶产生平端，这些都容易导致读码框错误，从而无法表达出来。2、宿主菌选择不当。不同的宿主菌其基因型是不同的。有些经过特殊修饰的载体，或者特殊用途的载体，或者有特殊启动子的载体，必须选择适...

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PCR反应体系包括什么

PCR是一种选择性体外快速扩增DNA片段的方法。在体外以类似于细胞内DNA的半保留复制过程，以拟扩增的模板DNA分子，与模板DNA互补的寡核苷酸引物、DNA聚合酶、4种dNTP及适合的缓冲体系组成的反应体系，经过重复地变性一退火一延伸三步，扩增新的目的DNA链，这个过程通过控制反应体系的温度来实现。那么你知道PCR反应体系包括什么吗？让我们一起来看看吧！一、模板(template)模板即扩增用的DNA，可以是任何来源DNA(如基因组DNA、质粒DNA等)或RNA(如总RNA、...

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